ВЕСТНИК
Башкирского университета

ENGLISH
Главная Авторам Рецензентам Выпуски журнала Редколлегия Редакция Загрузить статью Подписка ISSN 1998-4812

Архив | Том 22, 2017, No. 2.

ВЫДЕЛЕНИЕ ПРЕПАРАТИВНЫХ КОЛИЧЕСТВ ЛИПОПОЛИСАХАРИДОВ E. COLI МЕТОДОМ ЖИДКОСТНОЙ КОЛОНОЧНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Download
  • © О. И. Машков

    Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН

    Россия, Республика Башкортостан, 450054 г. Уфа, пр. Октября, 71

  • © Р. Р. Гарафутдинов

    Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН

    Россия, Республика Башкортостан, 450054 г. Уфа, пр. Октября, 71

  • © А. Р. Мавзютов

    Башкирский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской Федерации

    Россия, Республика Башкортостан, 450008 г. Уфа, ул. Ленина, 3

Липополисахариды клеточной стенки грамотрицательных бактерий в малых концентрациях способны увеличивать иммунную активность макроорганизма. Предложенные на сегодняшний день способы экстракции не позволяют получать в препаративных количествах липополисахариды достаточной чистоты. Использование модификаций существующих методик значительно снижает выход конечного продукта. В данной работе предложен оптимизированный метод выделения и очистки липополисахаридов E. coli посредством ультразвукового дробления бактериальных клеток, фенольно-хлороформной экстракции сырой массы липополисахаридов и разделения с помощью колоночной хроматографии на полярной неподвижной фазе. При выделении липополисахаридов согласно описываемому способу не происходит отщепления липида А, что подтверждается спектроскопией ЯМР 1Н.

Ключевые слова:

  • липополисахариды
  • ЛПС
  • E. coli
  • жидкостная колоночная хроматография
  • олигосахарид
  • липид А
  • lipopolysaccharides
  • LPS
  • E. coli
  • liquid column chromatography
  • oligosaccharide
  • lipid A

ЛИТЕРАТУРА

  1. Гайсина Ю. Р., Ахмадуллина Ю. А., Гильманов А. Ж., Мавзютов А. Р. Эндотоксинемия и влияние микробных липополисахаридов на систему гемостаза у женщин с бактериальным вагинозом // Медицинский вестник Башкортостана. 2011. Т. 6. №3. С. 155-159.
  2. Мавзютов А. Р., Бондаренко К. Р., Еникеев А. Н., Бондаренко В. М. Системная эндотоксинемия как патогенетический фактор осложнения беременности // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2012. №5. С. 16-21.
  3. Bryant C. E., Spring D. R., Gangloff M., Gay N. J. The molecular basis of the host response to lipopolysaccharide // Nature Reviews Microbiology. 2010. Vol. 8. No. 1. Pp. 8-14.
  4. Takada H., Kotani S. Structural requirements of lipid a for endotoxicity and other biological activities // CDC Crit Rev Microbiol. 1989. Vol. 16. Pp. 477-523.
  5. Alizadeh D., Zhang L., Brown C. E., Farrukh O., Jensen M. C., Badie B. Induction of anti-glioma natural killer cell response following multiple low-dose intracerebral CpG therapy //Clinical Cancer Research. 2010. Vol. 16. No. 13. Pp. 3399-3408.
  6. Westphal O., Lüderitz O., Bister F. Über die extraktion von bakterien mit phenol/wasser // Zeitschrift für Naturforschung B. 1952. Vol. 7. Pp. 148-155.
  7. Марков Е. Ю., Николаев В. Б. Способ получения бактериальных липополисахаридов: Патент РФ 2051969 // опубл. 10.01.1996.
  8. Galanos C., Luderitz O., Westphal O. A new method for the extraction of R lipopolysaccharides // Eur. J. Biochem. 1969. Vol. 9. Pp. 245-249.
  9. Darveau R. P., Hancock R. T. W. Procedure for isolation of bacterial lipopolysaccharides from both smooth and rough Pseudomonas aeruginosa and Salmonella typhimurium strains // J. Bacteriol. 1983. Vol. 155. No. 2. Pp. 831-838.
  10. Staub A. M. Removal of protein-Sevag method // Methods in Carbohydrate Chemistry. 1965. Pp. 92-93.
  11. Morrison D. C., Leive L. Fractions of lipopolysaccharide from Escherichia coli O111: B4 prepared by two extraction procedures // Journal of Biological Chemistry. 1975. Vol. 250. No. 8. Pp. 2911-2919.
  12. Delahooke D. M., Barclay G. R., Poxton I. R. A re-appraisal of the biological activity of bacteroides LPS // J. Med. Microbiol. 1995. Vol. 42. No. 2. Pp. 102-112.
  13. Sonesson A., Jantzen E., Bryn K., Larsson L., Eng J. Chemical composition of a lipopolysaccharide from Legionella pneumophila // Arch. Microbiol. 1989. Vol. 153. No. 1. Pp. 72-78.
  14. Eidhin D. N., Mounton C. A rapid method for preparation of rough and smooth lipopolysaccharide from Bacteroides, Porphyromonas and Prevotella // FEMS Microbiol. Lett. 1993. Vol. 110. No. 2. Pp. 133-138.
  15. Полунина Т. А., Гусева Н. П., Кузьмиченко И. А., Девдариани З. Л., Заднова С. П., Степанов А. В., Киреев М. Н. Новый способ получения липополисахарида возбудителя чумы // Проблемы особо опасных инфекций. 2014. Вып. 3. C. 100-103.
  16. Westphal O., Jann K. Bacterial lipopolysaccharides: extraction with phenol-water and further applications of the procedure // Methods in carbohydrate chemistry. 1965. Vol. 1. Pp. 83-91.
  17. Chafchaouni-Moussaoui I., Novikov A., Bhrada F., Perry M. B., Filali-Maltouf A., Caroff M. A new rapid and micro-scale hydrolysis, using triethylamine citrate, for lipopolysaccharide characterization by mass spectrometry // Rapid Communications in Mass Spectrometry. 2011. Vol. 25(14). Pp. 2043-2048.
  18. Гарафутдинов Р. Р., Машков О. И., Мавзютов А. Р. Способ получения липополисахаридов грамотрицательных бактерий: Заявка на патент РФ №2016108563 // приоритет от 09.03.2016.

Copyright © Вестник Башкирского университета 2010-2019